Injertos óseos - Nueva alternativa. Fase III. Obtención, caracterización y evaluación de Hidroxiapatita Sintética y el compuesto de Hidroxiapatita Sintética porosa – Proteínas Morfogenéticas Óseas en un modelo experimental Lapino / Osseous graft-New alternative. Phase III. Obtainment, characterization and evaluation of Synthetic Hydroxyapatite and a Porous Synthetic Hydroxyapatite and Bone Morphogenetic Protein Composite in a lapine experimental model

El propósito de esta investigación fue obtener Hidroxiapatita (HA) sintética de porosidad inducida con características osteoconductivas y mezclarlas con Proteínas Morfogenéticas Óseas (PMO) de características osteoinductivas, para que actuaran sinérgicamente y formaran un material de injerto biocompatible capaz de inducir la diferenciación de células locales a células formadoras de hueso y al mismo tiempo proporcionar un andamio osteoconductivo que dirigiera la formación de nuevo hueso, inmovilizara la molécula inductiva en el sitio de implantación por un tiempo suficiente para influenciar las células de respuesta y actuara como una barrera mecánica inicial para el crecimiento de tejido fibroso o la interposición de músculo en el defecto, para lograr finalmente el crecimiento de nuevo hueso en un tiempo considerablemente reducido y el total reemplazo del injerto por huesoenteramente autólogo. Para evaluar las características de este material, se utilizaron un total de 20 conejos machos raza Blanca de Nueva Zelanda, con un peso promedio de 2.2 kg y 75 días de edad, a los cuales se les creó un defecto óseo de forma rectangular de 8 mm de longitud y de profundidad igual a la corteza, en las diáfisis de las tibias, cara medial. En un miembro se implantaron placas de hidroxiapatita de 8mm de longitud y 2 mm de grosor; en el miembro contrario se implantó el compuesto HA-PMO. Se distribuyeron en 4 grupos de evaluación, a las 3, 6, 9 y 12 semanas de evolución, para valorar las características del implante; se realizó inferencia estadística de los datos tomados en el experimento, con un diseño en parcelas divididas siguiendo como estructura básica de aleatorización un DCA (Diseño Completamente al Azar), aplicando el factor t (tiempo) a las parcelas principales (conejos), y el factor i (tipo de implante) a las subparcelas (miembros posteriores).

Injertos óseos - Nueva alternativa. Fase II. Evaluación de las propiedades osteoinductoras de las proteínas morfogenéticas óseas parcialmente purificadas, implantadas en tejido subcutáneo de un modelo experimental lapino / Osseous Graft-New Alternative. Phase II. Evaluation of the osteoinductive properties of partially purified bone morphogenetic proteins, subcutaneously implanted in an experimental lapin model

: El propósito de esta investigación fue evaluar las características osteoinductivas de las Proteínas Morfogenéticas Óseas (PMO) parcialmente purificadas de hueso bovino, mediante implantaciónsubcutánea en un modelo experimental lapino, para ser utilizadas posteriormente como material de injerto óseo en combinación con un material osteoconductor. El procedimiento se llevó a cabo mediantela implantación subcutánea de ocho mg de PMO en la región dorsal a nivel de la escápula, en 21 conejos de Raza Blanca de Nueva Zelanda, los cuales se distribuyeron en 6 grupos de evaluación así: tres, seis, nueve, doce, veintiún días y ocho semanas de evolución, transcurridos estos tiempos se retiraron los implantes para ser evaluados histopatológicamente por microscopía óptica convencional y así caracterizar los diferentes elementos tisulares. Los resultados obtenidos se analizaron utilizando el método factorial de correspondencias múltiples con clasificación jerárquica, el cual mostró que las PMO estimulan la inducción de hueso en sitios ectópicos, teniendo actividad osteogénica ya que se observó presencia de trabéculas óseas en todas las muestras tomadas a partir del sexto día postimplante.

Injertos óseos - Nueva alternativa. Fase I. Extracción de proteínas morfogenéticas parcialmente purificadas de hueso bovino / Osseous graft - New alternative. Phase I.Extraction of partially purified bone morphogenetic proteins from bovine bone

El propósito de esta investigación fue extraer a partir de hueso bovino y mediante procedimientos químicos, Proteínas Morfogenéticas Óseas (PMO), parcialmente purificadas que posean características osteoinductivas, de alta calidad, baja antigenicidad y alta biodisponibilidad, para ser utilizadas como material de injerto óseo. El procedimiento se llevó a cabo mediante cinco etapas básicas así: Molienda del material; extracción de lípidos; desmineralización; extracción del colágeno; obtención de la fracción proteica. Para verificar la efectividad de la desmineralización y demás procesos, se procedió como sigue: Método de Soxhlet; espectrometría de Absorción Atómica deCalcio; tinción de picrofucsina de Van Gieson; electroforesis en Gel de Poliacrilamida-Dodecil Sulfato Sódico. Se obtuvo un material con proteínas de peso molecular aparente en el rango de 18 a 120 KDa,principalmente en las bandas correspondientes a 18, 24, 34, 68, 72, 90, 120 KDa, mediante electroforesis en Gel de Poliacrilamida Dodecil Sulfato Sódico (SDS-PAGE) el cual fue liofilizado y almacenado en ampollas de vidrio selladas al vacío para su conservación y uso posterior.